上(shàng)海錦玟：二氧化碳培養箱在動物細胞培養中的應用

    動物細胞多(duō)數(shù)需要微堿性環境，pH約為(wèi)7.2~7.4，以不超出6.8~7.6範圍為(wèi)宜。緩沖系統對于維持培養基的pH是至關重要的，動物培養基的pH是通(tōng)過模拟血漿中天然存在的

    CO2/NaHCO3（實際是CO32-/HCO3-）系統來(lái)控制(zhì)的。配置動物培養基時(shí)，會(huì)将NaHCO3作(zuò)為(wèi)等滲溶液的一部分添加到培養基。

     一方面，由于NaHCO3不穩定，易分解産CO2，CO2從培養液中遊離到空(kōng)氣中，會(huì)使培養液pH升高(gāo)；另一方面，細胞呼吸産生(shēng)的CO2以及代謝産生(shēng)的酸性代謝産物，又使pH降低(dī)。

       在培養開(kāi)始的一段時(shí)間(jiān)，細胞較少(shǎo)，呼吸産生(shēng)的CO2較少(shǎo)，前者作(zuò)用大(dà)于後者，培養液中pH可(kě)能會(huì)明(míng)顯上(shàng)升，這就需要培養箱中補充一定量的CO2來(lái)維持pH；而後期随着細胞數(shù)目增多(duō)，細胞産生(shēng)CO2增加，後者作(zuò)用便大(dà)于前者，此時(shí)，培養基中pH可(kě)能會(huì)明(míng)顯降低(dī)，盡管大(dà)多(duō)動物細胞耐酸能力比耐堿能力略強一些(xiē)，但(dàn)如果超過警戒值，則需要更換培養基進行(xíng)傳代。

     培養液中一般加入酚紅作(zuò)為(wèi)pH指示劑，所以此培養基中顔色變化是：櫻桃紅色→粉紅色→黃色。如果使用培養基之前，先通(tōng)入CO2，或在CO2培養箱內(nèi)進行(xíng)開(kāi)放式培養，則培養基顔色變化是：櫻桃紅色→黃色。如果培養基變黃，則需要及時(shí)更換培養基。

    培養箱中CO2濃度應與培養液中NaHCO3濃度相平衡，如果培養箱中CO2濃度設定在5%，培養液中NaHCO3的加入量應為(wèi)1.97 g/L；如果CO2濃度維持在10%，則NaHCO3的加入量應為(wèi)3.95 g/L。

     動物細胞對pH變化比較敏感，但(dàn)植物細胞就沒那(nà)麽嬌弱了，培養過程中pH的變化幅度隻要别太大(dà)，對它并不會(huì)造成明(míng)顯損傷。