當前位置:首頁 > 技(jì)術(shù)文章 > 用冷光源培養箱培養拟南芥
拟南芥作(zuò)為(wèi)高(gāo)等植物的模式生(shēng)物被*的植物生(shēng)物學實驗室廣泛研究。芥培養可(kě)用于基因表達、器(qì)官發育、基因突變等研究。然而,怎麽培養好這種小(xiǎo)植物可(kě)能不是那(nà)麽容易。
1、首先把拟南芥種子放到濾紙上(shàng),用70%酒精進行(xíng)消毒處理(lǐ),再用*進行(xíng)處理(lǐ)(也可(kě)選擇20%漂白劑以及0.05% Triton X-100 非離子表面活性劑做(zuò)殺菌處理(lǐ)20分鍾)。用無菌水(shuǐ)沖洗5遍,然後将種子點到MS培養基上(shàng),pH5.9,另加0.9%瓊脂以及2%蔗糖。
2、把種子放到冷光源培養箱中,設置4℃黑(hēi)暗條件下進行(xíng)春化48h-72h左右,在長日照或短(duǎn)日照條件下催芽。利用PLC控制(zhì)器(qì),編輯簡單的晝夜模式,設定光照時(shí)間(jiān)16小(xiǎo)時(shí)(黑(hēi)暗8小(xiǎo)時(shí))或者光照14小(xiǎo)時(shí)(黑(hēi)暗10小(xiǎo)時(shí));選配Q23+連續光強調節裝置,設定光照強度為(wèi)100-150umol/m2.s;設定室內(nèi)溫度為(wèi)光照條件下20-22℃,黑(hēi)暗條件下18-20℃;選配濕度控制(zhì)系統,設定室內(nèi)相對濕度70%。
3、出苗大(dà)約7~10天,然後移入土中培養,采用底部灌溉方式澆水(shuǐ)(利用土壤的毛細作(zuò)用)。在*次澆水(shuǐ)前,可(kě)使土壤*幹燥,以後每隔7~10天澆一次水(shuǐ)。
4、土壤可(kě)用營養土、蛭石以及珍珠岩比例10:1:1的比例配置,也可(kě)直接用堆肥、蛭石以及草炭等進行(xíng)混合。在生(shēng)長過程中,可(kě)用普通(tōng)的花(huā)肥施肥一次或者不施肥。
5、當植株長到一定高(gāo)度時(shí),可(kě)剪斷莖杆,以産生(shēng)更多(duō)的花(huā)序,可(kě)用于轉化研究或者獲得(de)更多(duō)的種子
拟南芥培養箱特殊培養
為(wèi)了加快拟南芥生(shēng)長速度,在移入土壤培養後,可(kě)設定長日照,利用PLC控制(zhì)器(qì),編輯程序設定24h光照,光強100-250umol/m2.s,溫度持續22-23℃。
拟南芥根系處理(lǐ)培養,可(kě)減少(shǎo)光照時(shí)間(jiān)為(wèi)8-12h,提高(gāo)光照強度為(wèi)100-350umol/m2.s,溫度為(wèi)光照條件下22-23℃,黑(hēi)暗條件下18-20℃,其餘培養條件同正常培養。
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